天文13年（1544）遠江の国・井伊谷。のちに井伊直虎（柴咲コウ）という勇ましい男名で戦国の世を生き抜くことになる少女・おとわ（新井美羽）は、井伊家当主の父・直盛（杉本哲太）と母・千賀（財前直見）のもと幸せな日々を過ごしていた。おてんばなおとわの遊び相手は幼なじみの亀之丞（藤本哉汰）と鶴丸（小林颯）。ある日、おとわに亀之丞との縁談話が舞い込む。当主の座を継ぐつもりだったおとわは最初戸惑うが、やがて亀之丞の妻として井伊家を支えていこうと心に決める。そんな折、亀之丞の父である井伊直満（宇梶剛士）が、主家である今川義元（春風亭昇太）に謀反の疑いをかけられ、駿府に呼び出され討たれてしまう。さらに今川は、亀之丞の首を差し出せとの命を下す。悩んだ末、井伊は亀之丞を逃がすことにした。